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一文讀懂臺盼藍染色原理

更新時(shí)間:2024-07-04瀏覽:114次

臺盼藍染色原理

臺盼藍(Trypan blue)是一種細胞活性染料,常用于細胞計數和細胞活力檢測。它可以通過(guò)細胞膜進(jìn)入細胞,并與細胞內的核酸結合,使細胞呈現藍色。對于喪失活性或細胞膜不完整的細胞,其細胞膜通透性增加,臺盼藍染料可以進(jìn)入細胞內,使細胞染成藍色。通過(guò)觀(guān)察被染成藍色細胞的數量,即可得出對應的細胞濃度。


 

 

細胞計數的操作流程

1-準備工作

·準備細胞懸液:將待檢測的細胞培養至適當濃度,收集細胞并制備成細胞懸液。

·準備臺盼藍染料:將0.4臺盼藍染料用PBS緩沖液稀釋至0.2%。

·準備細胞計數儀和計數板:使用全自動(dòng)細胞計數儀(JSY-SC-031H)和血細胞計數板、蓋玻片進(jìn)行細胞計數。

·準備移液器和吸頭:使用移液器和吸頭吸取細胞懸液和臺盼藍染料。


 

 

2-加入臺盼藍染料

·取適量的細胞懸液與離心管中。

·加入等量的臺盼藍染料(0.2%),再用移液槍輕輕吹打混勻。

 

3-上機檢測

·用移液器取10uL細胞混合液,加入血細胞計數板中。

·將加樣后的血細胞計數板放至細胞計數儀(JSY-SC-031H)的載物臺上,選擇對應的計數模式,即可開(kāi)始細胞計數分析(濃度計算公式=(四個(gè)大方格內細胞數之和)/4×(稀釋倍數)×104)。


 

4-查看結果數據

計數完成后,點(diǎn)擊數據詳情,查看細胞濃度、細胞直徑、細胞聚團率等數據。


 

 

注意事項

1-臺盼藍染料具有一定毒性,操作時(shí)需佩戴手套和口罩,避免接觸皮膚和吸入氣體。

2-臺盼藍染料需避光保存,避免陽(yáng)光直射。

3-臺盼藍染料適用于大多數細胞類(lèi)型,但無(wú)法很好的區分細胞和雜質(zhì),因此不適用于原代細胞、PBMC等含有大量雜質(zhì)碎片的細胞類(lèi)型。

4-加樣前,可將臺盼藍靜置數分鐘,取上層。

5-加樣時(shí),應盡量避免氣泡的產(chǎn)生,以免影響細胞計數的結果。

 

臺盼藍染料是一種常用的細胞活性染料,可用于細胞計數和活力檢測。在使用臺盼藍染料進(jìn)行細胞計數時(shí),需要注意操作流程和注意事項,以確保結果的準確性。

 

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