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實(shí)用干貨 | 酵母細胞如何有效計數?

更新時(shí)間:2023-10-26瀏覽:1045次

酵母細胞,也稱(chēng)酵母菌,在完成酵母細胞的制備后,科研人員需對酵母細胞的數量、死活、大小等進(jìn)行測定,觀(guān)測酵母細胞的生長(cháng)狀態(tài)。

目前酵母細胞可應用于食品工業(yè)、醫藥研究等領(lǐng)域,其中畢赤酵母細胞表達體系是目前已知酵母體系中表現ZuiHao的蛋白表達體系之一,可被用于納米抗體等醫藥疫苗方面。

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亞甲基藍染色法+人工顯微鏡計數(傳統方法)

傳統對酵母細胞的計數是以《國標:GB/T20886-2007,食品加工用酵母》為計數規則,使用亞甲基藍染色的方法,通過(guò)高倍數的顯微鏡和血細胞計數板-對酵母細胞進(jìn)行人工觀(guān)測計數。

缺點(diǎn).jpg

但亞甲基藍染料存在部分酵母細胞無(wú)法正常染色、染色時(shí)間長(cháng),且人工計數存在操作過(guò)程繁瑣、計數不準確、數據無(wú)法追溯等缺陷。



熒光酵母細胞計數儀+AOPI熒光染料 (新方法)

熒光酵母細胞計數儀,利用AOPI雙色熒光染色的方法,更加準確地得出酵母細胞的數量和活率,相比于人工顯微鏡計數操作更便捷、計數時(shí)間更短、數據可追溯等。

前期準備示意圖.jpg

前期準備熒光酵母細胞計數儀-細胞計數片-酵母細胞樣品-AOPI熒光染料-移液器


操作流程

1-用移液器,按11比例取酵母細胞樣品和AOPI熒光染料

2-用移液器反復吹打幾次,混勻后,取10uL細胞樣品,加樣至細胞計數片

3-上樣后,選擇相對應的細胞樣品類(lèi)型

4-點(diǎn)擊“開(kāi)始計數"——“查看數據"即可(全程自動(dòng)化操作,可實(shí)時(shí)觀(guān)察細胞圖像)


儀器介紹

JSY-FL-052型熒光酵母細胞計數儀,高倍放大光學(xué)系統,雙色熒光通道,對直徑≥1um的酵母細胞進(jìn)行精準計數分析。

052.png

儀器實(shí)拍細胞圖

1-釀酒酵母細胞(識別圖)





2-畢赤酵母細胞(識別圖)



詳情數據

計數結果包括總細胞濃度、活/死細胞濃度、活/死細胞比率、總細胞聚團率/濃度、活細胞聚團率/濃度、死細胞聚團率/濃度、活/死細胞直徑等計數結果、原始圖片、識別圖片、報告單等


 

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